Обзор дисфункций нейтрофилов собак и кошек

Нейтрофилы являются главными фагоцитами, которые защищают организм от бактериальной инфекции. Успешное уничтожение бактериальной инфекции требует сложных, тщательно согласованных взаимодействий между плазменными и тканевыми протеинами, эндотелиальными клетками и нейтрофилами. Эти совместные взаимодействия биологически активных протеинов, кровеносных сосудов и лейкоцитов составляют воспалительную реакцию.

Воспаление и функции нейтрофилов

Воспалительный процесс имеет три основных компонента. Во-первых, бактериальная инвазия и пертурбация тканей вызывают временное сужение микроциркуляторной или капиллярной части сосудистого русла. Циркуляция крови в пораженных тканях усиливается, вызывая лихорадку и покраснение тканей. Во-вторых, проницаемость микроциркуляторной части сосудистого русла обычно увеличивается в результате сжатия эндотелиальных клеток, цитокинных изменений в эндотелиальных клеточных соединениях, эндотелиального некроза и отслаивания клеток или вызываемых лейкоцитами повреждений эндотелиальных клеток. В конечном итоге увеличение проницаемости сосудов обеспечивает доступ межсосудистой, насыщенной протеином жидкости в ткани, наряду с замедлением потока крови через пораженные ткани.

В клиническом отношении жидкий экссудат или эдема проявляются в виде отека тканей. В-третьих, замедление потока крови позволяет лейкоцитам, в особенности нейтрофилам, скапливаться во внутренней поверхности капилляров и эмигрировать из капилляров в ткани в целях избавления от бактериальной инфекции.

По мере замедления потока крови в процессе воспаления лейкоциты выпадают из основного потока крови и скапливаются по направлению к эндотелиальной поверхности. После маргинации (феномен скопления лейкоцитов по краю участка воспаления) нейтрофилы вначале плавно движутся, а затем притягиваются или прилипают к эндотелиальной клеточной поверхности. Причиной этого служит экспрессия молекул селектина и интегрина на плазменные мембраны клеток нейтрофилов и эндотелиальных клеток. Движению нейтрофилов способствует экспрессия молекул селектина (L-селектина на нейтрофилы и P-и Е-селектина на эндотелиальные клетки), в то время как адгезия нейтрофилов происходит в результате более тесной связи между молекулами интегрина — CD-11-CD-18 комплекса и VLA-4 на нейтрофилы и внутриклеточных адгезионных молекул (ICAM-1 ICAM-2) и адгезионных молекул клеток сосудов (VCAM-1) на эндотелиальные клетки.

Впоследствии нейтрофилы расширяют псевдоподии между эндотелиальными клетками, переваривают небольшое количество мембраны основания и эмигрируют с микрососудистой части русла в интерстициальные ткани. Хотя нейтрофилы сохраняют жизнеспособность в здоровых тканях в течение 24-48 часов, срок их жизни значительно сокращается в период заболевания. Стареющие нейтрофилы последовательно фагоцитируются или заглатываются моноцитами-макрофагами или пропадают с поверхности слизистой или раны после миграции.

Внутри тканей нейтрофилы следуют за хемотастическим градиентом на один или несколько участков инфекции. Хемотаксические факторы, на которые реагируют нейтрофилы, бывают различными и включают составные части комплемента, метаболиты арахидоновой кислоты, производные кинина и продукты расщепления фибрина. Все эти вещества образуются после повреждения тканей, воспаления или попадания инфекции.

Когда нейтрофилы встречаются с бактериями, они распознают эти патогены, если они подверглись «опсоническому» воздействию иммунной сыворотки или были подготовлены нейтрофилами для фагоцитоза. В число опсонинов входят как иммуноглобулин G (IgG), так и фрагменты третьей составной части комплемента (СЗ). Специфические клеточные рецепторы, отвечающие за распознавание нейтрофилами опсонизированных бактерий, включают FciRрецептор, который обнаруживает Fcчасть IgG, и рецепторы комплемента 1, 2, 3 (CR1, 2, 3), которые обнаруживают и СЗb и СЗbi (стабильная форма СЗb).
После распознавания опсонизированные бактерии фагоцитируются, в то время как нейтрофилы одновременно выделяют кислородный импульс (Benderand Chickering,
1983)
. При фагоцитозе происходит адгезия бактерий на плазменную мембрану нейтрофила, расширение псевдоподии вокруг бактерии и слияние мембраны нейтрофила. После фагоцитоза интернализированная бактерия заключается в перевернутый мешочек плазменной мембраны, называемый фагосомой. Впоследствии фагосома срастается с первичными (азурофилъными) и вторичными (специфическими) гранулами нейтрофилов, образуя фаголизосому.

Уничтожение бактерий происходит в основном за счет кислородозависимых механизмов, включающих взаимодействие атомарного кислорода, ферментов и галогенидных ионов. Кислородный импульс вызывает образование различных токсичных кислородных радикалов, которые используются при уничтожении бактерий. Кислород и сокращенная форма никотинамида аденина динуклеотида фосфата (NADPH) в присутствии NADPH-оксидазы образуют супероксидный анион. Это высокореактивный кислородный радикал, который самопроизвольно разлагается, образуя пероксид водорода. Пероксид водорода в присутствии ионов хлорида превращается в хлорноватистую кислоту благодаря миелопероксидазе, ферменту, получаемому из первичных гранул нейтрофилов. Хлорноватистая кислота представляет собой сильноразбавленный отбеливатель (например, хлорокс), который очень токсичен по отношению к бактериям. Уничтожение бактерий при помощи кислородозависимых организмов производится путем ковалентной связи ионов хлорида или других галогенидов с внутриклеточными протеинами или посредством липидного перокисления мембраны и окислительного структурирования протеинов мембраны токсичными кислородными радикалами.

Хотя большинство бактерий уничтожается при помощи пероксидной миелоиероксидазной-галогенидной системы водорода, нейтрофилы также способны убивать бактерии при помощи кислородозависимых механизмов. В эти механизмы входят ферменты, такие как лизозимные или катионные протеины (например, протеины с увеличенной бактерицидной проницаемостью) и дефенсины. Лизоцим, присутствующий как в первичных, так и во вторичных гранулах, гидролизирует N-ацетилглюкосаминные связи мурамовой кислоты в бактериальной глюкопротеиновой оболочке. Дефенсины, присутствующие в первичной грануле, обладают высокой цитотоксичностью и представляют собой катионные протеины, насыщенные аргинином. Дефенсины образуют потенциал-воротные ионные каналы в бактериальной клеточной мембране, что приводит к увеличению проницаемости.

После уничтожения бактерий кислотные гидролазы из первичных гранул нейтрофилов переваривают эти бактерии. Перевариванию гидролазы способствует понижение pH (до 4-5) внутри фаголизомы.

Дисфункции нейтрофилов

Основная проблема исследования дисфункции нейтрофилов собак и кошек заключается в недостаточности данных об этом заболевании и лабораторных приборов для анализа всех видов функций нейтрофилов. Полный лабораторный анализ пациентов с предполагаемой дисфункцией нейтрофилов должен включать наряду с данными о сыворотке крови и клеточные параметры. Исследование всех этих параметров возможно только в некоторых научных лабораториях, однако можно приобрести коммерческие комплекты для подсчета иммуноглобулинов, некоторых компонентов комплемента и ослабления окраски тетразолиевого голубого (NBT).

Дисфункции нейтрофилов бывают наследственными или приобретенными. Подобные нарушения могут включать нарушения опсонической активности или генерации хемотаксического фактора в сыворотке крови и нарушения адгезии нейтрофилов, хемотаксиса, фагоцитоза и бактерицидной активности. Врожденная дисфункция нейтрофилов предполагается у новорожденных или бывает врожденной в семействах собак и кошек, у которых случаются повторные, иногда тяжелые и угрожающие жизни бактериальные инфекции при наличии нормальной или заметно увеличенной численности нейтрофилов. Клинические признаки включают периодонтит или гингивит, недостаточное заживание ран и лимфоаденопатию. В цитологических сборах из предполагаемых участков инфекции может недоставать нейтрофилов, особенно при. нарушении адгезии нейтрофилов или хемотаксиса. Приобретенная дисфункция нейтрофилов может иметь место как у молодых, так и у взрослых животных, у которых наблюдаются повторные бактериальные инфекции при наличии дерматологического или метаболического заболевания, вирусной инфекции или токсикоза.

Многочисленные примеры врожденной и приобретенной дисфункции нейтрофилов были рассмотрены и изучены на людях. В отличие от этого сообщения о дисфункции нейтрофилов у собак и кошек встречаются редко (таблица 1). По мере увеличения интереса к функции нейтрофилов в ветеринарной медицине будет появляться все больше примеров дисфункции нейтрофилов. Далее автором суммированы опубликованные данные на тему дисфункции нейтрофилов у собак и кошек.

Таблица 1. Врожденные и приобретенные дисфункции нейтрофилов у собак и кошек
Дисфункция Вид
Генерация хемотаксического фактора
Врожденные
СЗ-дефицит (британский спаниель)
Собака
Адгезия
Врожденные
CD-11 -CD-18-дефицит адгезионного протеина (ирландский сеттер)
Собака
Приобретенные
Сахарный диабет (плохо поддающийся лечению)
Собака
Хемотаксис
Врожденные
СЗ-дефицит (британский спаниель)
CD-11 -CD-18-дефицит адгезионногопротеина (ирландский сеттер)
Синдром Чедиак-Хигаши (персидская)
Аномалия Пельгера-Хюэта (фоксхаунд)
Первичная дискинезия реснитчатого тела(пойнтер)
Возвратные инфекции (веймаранер)
Собака
Собака
Кошка
Собака*
Собака
Собака
Приобретенные
Бактериальная пиодермия
Демодекоз
Вирус лейкемии кошек
Инфекционный перитонит кошек
Гипофосфатемия на фоне алиментарных нарушений
Прототекоз
Собака
Собака
Кошка
Кошка
Собака
Собака
Фагоцитоз
Врожденные
СЗ дефицит (британский спаниель)
CD-11 -CD-18 дефицит адгезионного протеина(ирландский сеттер)
Возвратные и устойчивые инфекции (веймаранер)
Приобретенные
Непрерывное центрифугирование потока крови и нейтрофилы, собранные путем фильтрации лейкафереза
Гипофосфатемия на фоне алиментарных нарушений
Собака
Собака
Собака

Собака
Собака

Уничтожение бактерий
ВрожденныеCD-1l-CD-18-дефицит адгезионного протеина (ирландский сеттер)
Циклическая нейтропения (мраморные колли)
Возвратные и устойчивые инфекции(веймаранер)
Синдром ринита и пневмонии(доберман)
Приобретенные
Вирусн лейкемии кошек
Гипофосфатемия на фонеалиментарных нарушений
Отравление свинцом
Воспаление, вызванное турпентином
Собака
Собака
Собака
Собака
Кошка
Собака
Собака
Собака
Собака
* Определение хемотаксиса нейтрофилов прошло лишь у одного из четырех англо-американских фоксхаундов с аномалией Пельгера-Хюэта; у других со­бак, в том числе фоксхаундов с данной аномалией, не было найдено наруше­ния хемотаксиса.

Врожденные или наследственные дисфункции нейтрофилов
Дефицит CD-11-CD-18 адгезионного протеина у собак.

Дефицит CD-11-CD-18 адгезионного протеина у собак (дефицит адгезионных молекул лейкоцитов, синдром гранулоцитопатии собак) впервые был отмечен у щенка ирландского сеттера наряду с сопутствующими инфекциями и нарушением бактерицидной активности нейтрофилов. Однако молекулярная основа заболевания не была ясна до 1986 года, когда было доказано отсутствие адгезионных протеинов CD-ll-CD-18. CD-11-CD-18 представляют собой интегрин, который позволяет нейтрофилам прилипать к эндотелию и другим матричным протеинам. Следовательно, дефицит данной молекулы влияет на адгезию нейтрофилов, хемотаксис и фагоцитоз.

Изредка в Соединенных Штатах и Швеции появлялись сообщения oCD-ll-CD-18 дефиците адгезионного протеина у ирландского сеттера и щенков помесей ирландского сеттера. Это нарушение передавалось по наследству как аутосомальный рецессивный признак. Данные о наличии возвратной бактериальной инфекции имеются до 12-недельного возраста. Клинические признаки включают гингивит, поверхностную пиодермию, глубокую кожную раневую инфекцию, пододерматит, омфалофлебит, лимфаденопатию, пневмонию и хромоту. Может иметь место значительный нейтрофильный лейкоцитоз (< 208 000 лейкоцитов/мкл). Кажется парадоксальным, что в цитологических сборах с пораженных участков определяется мало нейтрофилов. Недостаток адгезионных молекул CD-11-CD-18 внутриплазменной мембраны нейтрофилов связывается с сильным уменьшением адгезии, агрегации и хемотаксиса нейтрофилов. Несмотря на нормальную окислительную функцию нейтрофилов, у клеток нарушается фагоцитоз опсонизированных частиц, в том числе бактерий. При дефиците у живого животного CD-11-CD-18 адгезионных протеинов не удается избавиться от бактериальной инфекции из-за того, что нейтрофилы не способны достигнуть одного или нескольких участков инфекции или не могут эффективно осуществлять фагоцитоз бактерий.
СЗ-дефицит у британских спаниелей. Третьим компонентом комплемента (СЗ) служит вырабатываемый в печени плазменный протеин, который принимает участие как в классических, так и в альтернативных путях обмена комплементного каскада. СЗ имеет первостепенное значение для обоих путей обмена и отвечает за опсоническое влияние иммунной сыворотки на бактерии (СЗЬ, СЗЫ), генерацию мощного хемоаттрактанта для нейтрофилов (С5а) и образование атакующего мембранного комплекса (С5Ь6789), которые могут расщеплять некоторые микроорганизмы. Поэтому тяжелый врожденный дефицит СЗ предрасполагает к развитию тяжелой инфекции.

Дефицит СЗ был описан у британских спаниелей и передавался как аутосомальный рецессивный признак. У собак, являющихся гомозиготными по отношению к СЗ-дефициту, может развиться бактериальная инфекция, представляющая угрозу для жизни, например, пневмония, сепсис, пиометра (скопление гноя в полости матки). Отдельные бактериальные инфекции часто включают Clostridiumsp., Escherichiacolyи Klebsiellasp. Лабораторное обследование собак с клиническими признаками данного заболевания показывает сильное уменьшение или отсутствие СЗ в сыворотке крови, неспособность генерировать хемотаксические факторы (С5а) для нейтрофилов и неспособность опсонизировать бактерии. Следовательно, хемотаксис и фагоцитоз нейтрофилов могут рассматриваться как нарушение.

Возвратные инфекции у веймаранеров. Возвратные и устойчивые бактериальные инфекции были описаны у веймаранеров из Австралии, Соединенных Штатах и Бельгии. Австралийские собаки с наследственным нарушением функции нейтрофилов часто оказываются в родственных связях друг с другом. Хотя не имеется полных характеристик данного заболевания, нарушения нейтрофилов включают понижение хемилюминесценции нейтрофилов, которое сопровождается уменьшением образования кислородных радикалов для уничтожения бактерий. Кроме того, у двух собак было обнаружено нарушение фагоцитоза нейтрофилов и неспособность уничтожать StaphylococcusAureus.

Хронический ринит и пневмония у доберманов.
Имеется сообщение о восьми доберманах, состоящих в близком родстве друг с другом, с хроническими заболеваниями дыхательных органов, в том числе ринитом и пневмонией. Немногочисленные лабораторные анализы показали, что нейтрофилы осуществляют нормальный фагоцитоз бактерий, но у них наблюдается нарушение бактерицидной активности. Нарушение и уничтожение Staphylococcusepidermidis связано с неспособностью нейтрофилов генерировать токсичные кислородные радикалы после соответствующей клеточной стимуляции. Пораженные нейтрофилы также не способны вызвать ослабление окраски тетразолиевого голубого или образовать супероксид. Нарушение опсонизации патогенов не несет ответственности за нарушение фагоцитоза, поскольку концентрация иммуноглобулина и комплемента находится в пределах заданного диапазона или увеличена. Данное заболевание несколько напоминает хронический гранулематоз или рецепторный дефицит комплемента у людей; однако для определения молекулярной основы данного заболевания у больных собак понадобятся более углубленные исследования.

Синдром Чедиак-Хигаши у кошек. Синдром Чедиак-Хигаши (аномалия Чедиак-Штейнбринк-Хигаши, врожденный гигантизм пероксидазных гранул) отмечался у персидских кошек с неотчетливой дымчато-голубоватой окраской шерсти и желто-зеленой радужной оболочкой глаз. Данное заболевание, передаваемое как аутосомальный рецессивный признак, характеризуется увеличением цитоплазмических гранул лейкоцитов и меланоцитов в кровообращении. Увеличение гранул лейкоцитов происходит в результате слияния раннее существовавших липосом более нормальных размеров и, судя по мазкам крови, окрашенным по методу Романовского, имеющих вид розовых или красных цитоплазмических включений диаметром 2 мкм. Несмотря на наличие нарушений в хемотаксисе нейтрофилов, больные кошки не настолько предрасположены к инфекции, как люди. Экспериментальные исследования документально подтвердили наличие слабой нейтропении, но она не распознается в обычных клинических условиях.

Циклический гемопоэз у серых мраморных колли.
Циклический гемопоэз является наследственным заболеванием стволовых клеток у мраморных колли, которое передается как аутосомальный рецессивный признак. У больных собак шерсть бывает обесцвеченной (серебристо-серой, бежевой или цвета древесного угля). Несмотря на то, что численность лейкоцитов, тромбоцитов и ретикулоцитов подчиняется регулярным циклам, глубокая нейтропения вызывает самые тяжелые клинические последствия. Повторная тяжелая нейтропения является причиной бактериальной инфекции, которая может представлять угрозу для жизни. Кроме того, повторные инфекции приводят к вторичному системному амилоидозу. Больные колли обычно погибают в течение первого года жизни. Продление жизни возможно лишь благодаря трансплантации костного мозга. Хотя нейтрофилы у мраморных колли должным образом осуществляют фагоцитоз бактерий, уничтожение бактерий сильно усложнено в результате дефицита миелопероксидазы.

Аномалия Пельгера-Хюэта у собак и кошек. Аномалия Пельгера-Хюэта является врожденным нарушением развития лейкоцитов, которое характеризуется в первую очередь ядерной гипосегментацией гранулоцитов в присутствии зрелого ядерного хроматина. Ядерная гипосег-ментация имеет вид дегенеративного сдвига влево у окрашенного мазка крови. Данная аномалия наблюдается у собак различных пород и домашних короткошерстных кошек. Эта аномалия предположительно передается в качестве аутосомалыюго доминантного признака у собак и кошек. Однако в соответствии с последними данными, полученными автором при исследовании австралийских собак, передача данной аномалии является не полностью доминантной и управляется двумя или более генами.

Имеются данные о нарушении миграции нейтрофилов на участках повреждения кожи у одного англо-американского фоксхаунда. Однако исследования данной аномалии у пяти собак показывают, что у пораженных нейтрофилов наблюдаются нормальная адгезия, случайные движения, хемотаксис, фагоцитоз и бактерицидная активность. У собак и кошек с данной аномалией обычно не имеется клинических данных, подтверждающих дисфункцию нейтрофилов. В обширном исследовании, проведенном на людях с аномалией Пельгера-Хюэта, также не выявлено нарушение функции нейтрофилов.

Приобретенные дисфункции нейтрофилов
Многочисленные примеры приобретенной дисфункции нейтрофилов встречаются у людей, больных сепсисом, вирусными инфекциями, сахарным диабетом, страдающих недоеданием, принимающих лекарственные препараты, больных красной волчанкой и ревматоидным артритом. О приобретенной дисфункции нейтрофилов у собак и кошек было опубликовано лишь несколько сообщений (таблица 1).

Заболевания, при которых отмечается приобретенная дисфункция нейтрофилов, включают слабо поддающийся лечению сахарный диабет, бактериальную пиодермию, демодекоз, отравление свинцом, гипофосфатемию, вызванную перееданием, воспаления и прототекоз. Уменьшение адгезии нейтрофилов в некоторой степени может быть причиной увеличения количества инфекционных заболеваний у больных диабетом, плохо поддающимся лечению. О предполагаемых ингибиторах хемотаксиса нейтрофилов сообщалось как при демодекозе, так и при прототекозе. Бактериальная пиодермия, особенно при заражении Staphylococcussp.,вызывается нарушением хемотаксиса нейтрофилов. Отравление свинцом провоцирует понижение бактерицидной активности нейтрофилов в результате приобретенного дефицита миелопероксидазы. При воспалениях также наблюдается временное уменьшение бактерицидной активности нейтрофилов. Многочисленные нарушения функции нейтрофилов, как, например, при гипофосфатемии, вызванной перееданием, можно распознать, если подвергнуть одновременной оценке все главные параметры функции нейтрофилов.

До настоящего времени имелись сообщения о дисфункции нейтрофилов у кошек с вирусными инфекциями. Уменьшение хемотаксиса нейтрофилов было отмечено у клинически больных кошек, зараженных вирусом лейкемии. И напротив, уменьшение хемотаксиса нейтрофилов не наблюдалось у кошек с субклинической ВЛК-инфекцией и у больных кошек без ВЛК-инфекции. В предыдущих исследованиях также высказывалось пред* положение, что уничтожение бактерий может уменьшиться за счет неспособности должным образом генерировать кислородные радикалы. Нарушение хемотаксиса нейтрофилов также было доказано у некоторых кошек с инфекционным перитонитом. Молекулярная основа клеточных дисфункций при этих вирусных инфекциях не была выяснена.

Лабораторная оценка функции нейтрофилов

Получение документальных данных о дисфункции нейт-рофилов с помощью лабораторных анализов является дорогой, сложной и трудоемкой процедурой и требует специальной подготовки нейтрофилов. К сожалению, для многих биологических анализов функции нейтрофилов характерны непостоянство или наследственные ограничения. Из-за этого бывает трудно обнаружить слабые нарушения функции нейтрофилов. В дальнейшем на функцию нейтрофилов оказывают влияние воспаления, инфекции и лекарственные препараты. Чтобы уменьшить действие последних, желательно провести исследование функции нейтрофилов в период ремиссии заболевания и отмены препаратов. При подозрении на наличие дисфункции нейтрофилов следует сделать анализы для оценки опсонизационной активности и генерации хемотаксических факторов из сыворотки крови, а также адгезии нейтрофилов, хемотаксиса, фагоцитоза и уничтожения бактерий.
Опсонизация оценивается по концентрации иммуноглобулина (особенно IgG) и комплемента (СЗ) в сыворотке крови у пациента и по анализу способности сыворотки поддерживать фагоцитоз бактерий. При концентрации IgG менее обычного желательно установить образование антигенов к Т-лимфоцит-зависимым (тетанус токсоид) и Т-лимфоцит-независимым (Brucellaabortusantigen, эритроциты, взятые у овцы) антигенам. Кроме того, предусмотрительный врач должен измерить количество иммунных комплексов в системе кровообращения для оценки катаболизма антител.
Генерацию хемотаксических факторов можно оценить путем подсчета хемотаксиса контрольных нейтрофилов в сыворотке крови у пациентов, которые были «активированы» благодаря предыдущему воздействию дрожжевой инфекции (зимозана) или очищенного эндотоксина.

Адгезия измеряется путем процента нейтрофилов у пациента, которые прилипают к столбикам из нейлоновых волокон. При наличии нарушения адгезии для оценки CD-ll-CD-18-экспрессии интегрина на плазменной мембране нейтрофила можно использовать метод проточной цитометрии и флуоресцеиновых изотиоцианатных (ИТС)-конъюгированных моноклональных антител.
Хемотаксис можно измерять invitroпо миграции нейтрофилов при агарозе или с помощью миграции мембраны поликарбоната в слепой ячейке (модифицированной камере Бойдена) при реакции на хемотаксическую составляющую. Анализ хемотаксиса invivoможно произвести путем учета миграции нейтрофилов в «кожные окна» или камеры на участках незначительных повреждений кожи. Хемоаттрактант обычно является эндотоксин- или зимозан-активированной смешанной сывороткой доноров. В отличие от некоторых видов животных, включая человека, нейтрофилы у собак и кошек не реагируют на N-формил-метионил-лейцил-фенилаланин (f-MLP) синтетический хемотаксический трипептид.

Фагоцитоз нейтрофилов можно подсчитать при помощи световой микроскопии или проточной цитометрии. Нейтрофилы питаются опсонизированными флюоресцентными латексными гранулами, импрегнированными латексными гранулами тетразолиевого голубого и бактериями. Проточная цитометрия позволяет подсчитать процент фагоцитных нейтрофилов и точно установить до пяти флюоресцентных латексных гранул в клетке. Эти параметры также можно подсчитать при помощи светового микроскопа, но это более трудоемкий метод. Однако он позволяет отличить прикрепление бактерий к клеточной мембране от их действительного поглощения или фагоцитоза. Важная роль ослабления окраски тетразолиевого голубого будет объяснена далее.
Бактерицидную активность нейтрофилов можно подсчитать прямым или косвенным путем. Косвенный анализ предположительной бактерицидной способности производится путем измерения иодирования (1251) протеина по пероксидной-миелопероксидазной-галогенидной реакции водорода, ослаблению окраски тетразолиевого голубого (желтого) на формазан (синюю) под действием кислородных радикалов, хемолюминесценции с люминолом, по мере того как супероксид выделяет цвет при переходе из возбужденного состояния в состояние покоя и происходит изменение цитохимической окраски или химического анализа из-за активности миелопероксидазы. Прямой анализ бактерицидной активности осуществляется путем кормления нейтрофилов опсонизированными патогенными бактериями в лог-фазе. Число убитых бактерий обычно подсчитывается путем проверки лизатов нейтрофилов на наличие жизнеспособных бактерий при помощи высевания культуры на агаре.

Лечение дисфункции нейтрофилов

При врожденных нарушениях функции нейтрофилов редко возможно специфическое лечение. Однако диагностика функциональных нарушений нейтрофилов позволяет врачу предположить наличие бактериальных инфекций и заранее планировать медикаментозное лечение этих осложнений. При некоторых врожденных нарушениях, таких как синдром мраморных колли, помогает трансплантация костного мозга, но она производилась только во время научных исследований. В клинических условиях пересадка костного мозга непрактична, так как требуются значительная гистосовместимость и соответствие группы крови, пациентов нужно готовить к трансплантации путем облучения всего организма и химиотерапии, и трудно бывает бороться с бактериальной инфекцией во время приживления трансплантата. Из-за указанных соображений пересадка костного мозга считается сложной и дорогой.

Врачу лучше всего удается справиться с приобретенной дисфункцией нейтрофилов путем устранения или борьбы с основным заболеванием. Данный метод состоит в лечении соответствующими антибиотиками при бактериальной пиодермии путем четкого контроля введения инсулина при диабете и регулировании фосфора алиментарных нарушениях у животных.

Добавить комментарий

Ваш адрес email не будет опубликован. Обязательные поля помечены *