Диагностика и профилактика дирофиляриоза у собак

Немногие заболевания так хорошо знакомы владельцам собак, как инвазия филяриями (сердечными гельминтами Dirofilariaimmitis). Уже много лет благодаря Американскому обществу но борьбе с дирофиляриозом, а также Американской ветеринарной ассоциации информация об этом заболевании распространяется среди ветеринаров и общественности США. Причинами хорошей изученности этой болезни являются ее широкое распространение в последние 50 лет и наносимый ею явный вред здоровью животных. Рост общественного сознания относительно заботы о здоровье животных создал среди владельцев собак огромный рынок сбыта как тестовых методик, так и антифиляриальных препаратов, что принесло большие прибыли ветеринарным врачам и фирмам-разработчикам. Филяриальная инвазия постоянно находится в центре интересов, поэтому все новые разработки требуют внимания. За последние годы врачи во многих географических регионах разработали скрининговые тесты для собак с отсутствием симптомов для раннего выявления филяриальной инвазии и фармацевтические методы ее профилактики. Дальнейшее обсуждение относится как к последним рекомендациям Американского общества по борьбе с дирофиляриозом, так и отражает точку зрения автора.

Перспективный скрининг

Филяриальная инвазия является потенциальным, но не всегда установленным фактом во многих популяциях собак в континентальной части США. Хотя филярии могут распространяться через вектор трансмиссии из питомников в эндемичных зонах, любители собак, живущие в кажущихся изолированными регионах, должны настороженно относиться к ввозу уже зараженных собак. Решение о введении скрининговых тестов зависит от угрозы филяриальной инвазии. Даже если заболевание не выявлено в отдельной популяции, должен осуществляться постоянный мониторинг за инфицированными москитами, чтобы не дать заболеванию стать эндемичным. Любые собаки, взятые даже из популяций с низкой заболеваемостью, должны быть тестированы, чтобы выявить все резервуары инфекции.

Тесты на антигены к филяриям
С 1992 года Американское общество по борьбе с дирофиляриозом рекомендует тесты на антигены как первую меру в скрининговых методах выявления филяриальной инвазии. Только у отдельных собак могут присутствовать микрофилярии в циркуляции без определимой антигенемии. Эта ситуация отражает собой переходную фазу легкой инвазии, которая обычно наблюдается через 6,5 месяцев после самой инвазии, когда микрофилярии только начинают появляться. У большинства этих собак со временем развивается антигенемия, тогда их нужно тестировать повторно. У собак с антигенемией микрофилярии обычно отсутствуют, однако, на основе паразитологических методов диагноз филяриальной инвазии ставят 20-25% собак. Филяриальная инвазия без микрофиляремии относится к категории «скрытой».

Скрытая инвазия
Этиология. Серологические тесты изначально разрабатывали для выявления микрофилярия-негативных собак с иммунообусловленной гиперчувствительностью к микрофиляриям. Симптомы у этих собак часто соответствуют филяриальному аллергическому пневмониту или хроническому сердечно-легочному заболеванию. Хотя это один из наиболее важных типов скрытой инвазии, он не может быть широко распространен из-за широко практикуемой фармацевтической профилактики. При этом большинству собак назначают один из макролидных эндектоцидов, ивермектин или милбемицина оксим. Оба препарата в профилактических дозах являются микрофилярияцидными и подавляют развитие микрофилярий (LokandKnight, 1995). У инвазирова иных собак, которых лечили этими препаратами, редко развивается микрофиляриемия, либо они неизбежно становятся микрофилярия-негативными. Также наблюдается инвазия филяриями только одного пола, либо наблюдается легкая инвазия с физическим разделением полов, когда выход микрофилярий невозможен. И наконец, препатентные инвазии являются важной категорией скрытых инвазий, потому что обычно они антиген-негативны и являются амикрофиляремичными.

Скрытые инвазии, выявленные тестами на антигены.
Ни один из коммерческих тестов на антигены не способен выявить инвазию мужскими особями филярий. Однако каждый из них обладает высокой чувствительностью к инвазии женскими особями. При препатентной инвазии через 5,5-6 месяцев после заражения вырабатывается только незначительное количество антигена, однако некоторых ложноположительных результатов можно ожидать в течение 7 месяцев после заражения, пока женские особи еще не достигли зрелости. Количество антигена в циркулирующей крови представляет собой прямую, хотя и нелинейную зависимость от количества зрелых женских филярий. Можно идентифицировать инвазию уже с тремя и более зрелыми женскими особями (McTier; 1994; McTieretal., 1995). Учитывая эти моменты, тестами на антигены можно выявить иммунообусловленную, лекарственную скрытую инвазию и скрытую инвазию только женскими особями филярий.

Роль теста на антигены в профилактике дирофиляриоза
Тестирование является составной частью общей программы медикаментозной профилактики. Вообще, это первый шаг в данной программе, пока собака еще не заражена или заражена недавно, так что антигенемия (или микрофиляриемия) еще не получила развития. Очень важно, чтобы инвазивный статус был известен уже в начале профилактики, чтобы последующие ошибки в профилактике отделить от других заболеваний. В высокоэндемичных регионах следует проводить повторные тесты через год после начальной профилактики, чтобы убедиться в эффективности программы. Следовательно, наблюдение должно продолжаться и сопровождаться повторными тестами (каждые 2-3 года), которые также необходимы в случае снижения защиты.

Точное время тестирования для получения лучших результатов. Важное значение в тестировании имеет точный момент времени. Тестовое окно не появляется до полного созревания филярий и появления значительного уровня циркулирующих антигенов (или микрофилярий). У антиген-позитивных собак антиген можно найти только через 7 месяцев после инвазии. Следовательно, 7 месяцев является абсолютным минимальным возрастом для каждого щенка, родившегося во время сезона передачи, которого следует тестировать. Перед исключением инвазии на основе отрицательных результатов теста на антигены этот латентный период следует добавить к последней дате, когда могла произойти инвазия собаки. Для этих расчетов нужно знать о местных трансмиссивных сезонах филярий.

При большом объеме тестируемых собак очень трудно выявить всех животных, для которых нужно повторное тестирование в тот же 2-3-месячный период трансмиссии. Большинство клиницистов, которые настаивают на ежегодном повторном тестировании, имеют данные за год и не понимают, что (в зависимости от времени) они могут частично повредить раннему выявлению инвазии. Следует проводить тестирование в трансмиссивный сезон, с середины июня до конца сентября, что типично для территории США. Если инвазия наблюдается в самый ранний срок, а собаку ежегодно тестируют в декабре, когда инвазия находится в конце латентного периода, тогда ее можно будет идентифицировать только в следующем декабре, то есть через 18 месяцев после инвазии. Такой же интервал наблюдается для собак, инвазированных в конце сентября, а тестируемых в начале апреля. Таким образом, ежегодное тестирование никак не может покрыть эти интервалы. Выходом является профилактическое назначение макролидных эндектоцидов, тогда ежегодное тестирование не нужно. Тем не менее, адекватно защищенных собак нужно периодически тестировать раз в 2-3 года.

Интерпретация тестов на антигены
Широкое распространение тестирования и медикаментозной профилактики дирофиляриоза оказало большое влияние на сокращение заболеваемости. Снижены процент и тяжесть заболевания, которое диагностируют до появления клинических и рентгенографических симптомов. Следовательно, главным показателем инвазии являются положительные результаты еженедельного теста на антигены. Возражений этому множество: дело в том, что надежность этих тестов основана не на их способности выявлять большинство инвазированных собак (чувствительности), а на малом числе ошибочных положительных результатов при тестировании неинвазированных собак (специфичности). Этот малый уровень ложноположительных результатов имеет большое значение, потому что в большинстве популяций уровень инвазии составляет менее 5%, а в некоторых клинических популяциях, где постоянно проводят профилактику, — менее 1%. В последнем случае даже ложноположительный уровень в 1% (99%-ная специфичность) снижает предполагаемое значение положительного результата теста на 50% (больше ложных, чем истинных положительных результатов). При начале лечения на основе ложноположительного результата следует ожидать как финансовых, так и ветеринарных проблем. С другой стороны, упущение в идентификации легкоинвазированных собак с незначительной антигенемией не принесет большого вреда их здоровью, потому что рано или поздно ее выявят при повторном тестировании. К счастью, иммуносорбентный тест связывания фермента ELISA и иммунохроматографический тест на антигены обладают высокой специфичностью в выявлении собак, которые считаются инвазированными.

Следует всегда верифицировать положительные результаты тестов на антигены, особенно если тест положителен только одну неделю. Нахождение в крови Dirofilariaimmitis подтверждает диагноз. Однако микрофилярии могут отсутствовать, как и клинические и рентгенографические симптомы. В этих случаях нужно повторить тест на антигены с тщательным выполнением процедуры. Можно для подтверждения использовать другой вид теста. Визуализировать паразитов в главной легочной артерии и проксимальном конце ее междолевой ветви можно с помощью двухмерной эхокардиографии, но вряд ли это имеет смысл для собак с легкой степенью инвазии. Если клинические доказательства инвазии перевешивают результаты теста на антигены, то ставят предварительный диагноз. В этих случаях назначают профилактическое лечение до следующего теста на антигены через несколько месяцев.

Выбор теста на антигены
Тесты на антигены становятся все более точными и легкими в применении. В продаже есть несколько типов тестовых наборов, где используются различные методы и тестовые форматы (таблица 1).

Таблица 1. Некоторые тесты на антигены
Иммуносорбентный тест связывания ферментв ELISA
Микролунки DiroCHEK Synbiotic Corp.,
San Diego, CA
PetCHEK HTWM PF INDEXX, Westbrook, ME
Мембрана SNAP Heartworm PF
Antigen Test Kit
INDEXX
UNI-TEC CHW Synbiotic
Палочка ASSURE/CH Synbiotic
Метод коллоидного золотa
Мембрана ICT GOLD HW Synbiotic
WITNESS HW Synbiotic
Гемaгглютинвция
Плашки с лунками VetRED Canine
Heartworm
Antigen Test Kit
Synbiotic

Хотя эти тесты выполняют в соответствующих лабораториях, о полуколичественном определении антигенемии по визуальной инспекции тестов ELISA обычно не сообщается. Эта информация дополняет результаты общего осмотра и рентгенографической оценки животного и показывает текущее состояние инвазии. Степень инвазии является основным пунктом, от которого зависит разработка стратегии лечения инвазированных собак и тех животных, которых уже лечили.

Подробное описание и сравнительная характеристика различных тестов дана в соответствующих источниках (McTier, 1994; McTieretal., 1995). У каждого теста свои свойства, которые делают его предпочтительным в той или иной ситуации. Далее мы приводим ряд факторов, которые должен учесть ветеринарный врач при выборе одного или двух тестов, подходящих для текущей ситуации.

Точность. Все коммерческие наборы обладают точностью от хорошей до превосходной. Некоторые различия в чувствительности не настолько важны. У тестов ELISA и ICT и чувствительность, и специфичность лучше, чем у тестов на гемагглютинацию. Низкая чувствительность теста на гемагглютинацию частично объясняется трудностью в дифференциации агглютинации от монетных столбиков из эритроцитов, что делает этот тест менее пригодным для скрининга собак с маловероятной инвазией. Статистики, сравнивая отдельные тесты, должны критически относиться к этому вопросу, оценивая результаты тестов одних и тех же образцов.

Групповое тестирование. Когда нужно провести групповое тестирование большого количества образцов, наиболее эффективной и недорогостоящей будет система микролунок. Однако для этого требуется определенный опыт. Этот тест считают пропуском на выставку, потому что в нем предусмотрен контроль истинно положительных и истинно отрицательных результатов.

Время тестирования. За исключением системы микролунок, все остальные тесты предназначены для индивидуального тестирования, хотя ограниченное группирование возможно при проведении тестов ELISA и ICT. Тест VetRED дает наиболее достоверные результаты, но они сильно зависят от времени тестирования.

Преимущества. Технические аспекты тестов на антигены сильно упрощены. Для системы микролунок и тестового аппарата берут образцы плазмы, сыворотки или цельную кровь. В аппаратах SNAP и ICTGold ряд шагов автоматизирован, что еще более снижает количество ошибок оператора. Мембрана, на которой происходит реакция, также удаляется и хранится как запись для сравнения последующих положительных результатов при повторном серийном тестировании собак.

Для лучших результатов следует тестировать свежие или замороженные образцы. В этих тестах используются иммунохимические и ферментные реакции, поэтому перед реакцией все реагенты должны иметь комнатную температуру.

Тестирование на микрофилярии
Тест на микрофилярии может заменять тесты на антигены только при начале или возобновлении профилактического лечения диэтилкарбамазином (DEC), потому что этот препарат опасен для собак с микрофиляриемией. Концентрационный (Кнотта или фильтровальный) тест на микрофилярии нужен как для подтверждения положительных результатов теста на антигены, особенно у асимптоматичных собак без других признаков инвазии, так и для определения стадии жизненного цикла, что нужно для филяриацидной терапии. Вид организмов определяется по суженной форме головы микрофилярий вида D. immitis.

Профилактическое лечение

Филяриальную инвазию легко предотвратить, но очень трудно и дорого лечить. Профилактическое лечение применяют всякий раз, когда есть подозрение на инвазию. Используют два класса препаратов. Основным выбором является ежемесячное назначение макролидных эндектоцидов ивермектина (Heartgard-ЗО и Heartgard-30 Plus, MerialLtd.) и милбемицина оксим (Интерцептор, NovartisAnimalHealthUS, Inc.).Эти препараты удобны в использовании, безопасны и дают гарантированную защиту. В настоящее время они практически вытеснили препараты-производные пиперазина DEC(Филарибитс и Филарибитс плюс, PfizerAnimalHealthи другие), которые применялись раньше и на ежедневной основе.

Макролидные эндектоциды. Профилактические дозы ивермектина (6-12 мкг/кг) и милбемицина оксима (0,5-1 мг/кг) не токсичны даже для колли, которые особенно чувствительны к этим препаратам в высоких дозах. Несмотря на короткий период полувыведения, макролиды, назначаемые с месячным интервалом, оказывают полное филяриацидное действие на личинки филярий, которые еще не достигли сердца (четвертая стадия), прежде чем те разовьются в патологическую взрослую стадию. При постоянном действии инвазии просачивающаяся инфекция будет стимулировать защитный иммунитет организма, оказывая профилактическое действие. После прекращения контакта с инвазированными собаками профилактическое лечение назначают в течение месяца после начала контакта и продолжают еще месяц после прекращения контакта с инвазированными животными. Ретроактивное действие макролидного эндектоцида ивермектина было зафиксировано в течение 4 месяцев после инвазии, когда его продолжали давать ежемесячно в течение 12 месяцев (McCalletal., 1995). Этот продолжительный период повышает безопасность животных, но из-за этого не следует увеличивать интервалы между профилактическим назначением препаратов. Однако, если собака оказалась в сезоне передачи инфекции, а профилактическое лечение еще не началось, возможность заражения можно значительно уменьшить скорейшим началом лечения. Более того, при сокращении лечения, направленного на уничтожение взрослых особей, или при неопределенной отсрочке лечения собак с патентной инвазией, можно ввести ежемесячное назначение препаратов в профилактических дозах, сохранив те же предосторожности и наблюдение, как в случае элиминации микрофилярий.

Диэтилкарбамазина цитрат. Профилактическое лечение DECсильно зависит от обязательного ежедневного применения препарата (6,6 мг/кг), что должно начаться одновременно с ожидаемым появлением инвазированных москитов и закончиться через 2 месяца после окончания сезона передачи инфекции. Прекращение использования препарата в течение нескольких циклов может лишить животное защиты.

Сезон передачи филярий
Схема передачи. Передача филярий зависит от стечения обстоятельств, а именно, присутствия микрофиляремичных представителей семейства псовых как резервуара инвазии, москитов, которые питаются кровью собак и способны стать промежуточным хозяином и вектором, и климатических условий, которые способствуют размножению москитов и выведению микрофилярий для передачи на личиночной стадии. Существенны все моменты, но климат является контролирующим фактором. Для инкубации личинок требуется среднесуточная температура 18 °С. Увеличение температуры ускоряет созревание личинок: так, для роста личинок до инвазивной стадии нужно 8 дней при температуре 30 °С и 29 дней — при температуре 18 °С. При температуре меньше 18 °С москиты менее активно ищут пищу и не могут достаточно долго содержать в себе личинки для их созревания. Следовательно, в Северном полушарии сезон передачи попадает на период с июля по август (KnightandLok, 1995; Slocombeetal., 1995). Продолжительность сезона передачи увеличивается в субтропиках: так, в Южной Флориде сезон передачи на 3 месяца больше, чем в Северной Миннесоте. За исключением юго-восточных и прибрежных штатов, сезон передачи на континентальной части США составляет 6 месяцев и меньше (рис. 1).

 

Рис. 1. Цифры показывают месяцы, в которые следует назначать первые (А) и последние (В) профилактические дозы макролидов, чтобы предотвратить инвазию. Цифры соответствуют показаниям примерно 200 метеостанций. Цифра 1 показывает круглогодичный прием профилактических доз, а цифра 0 — отсутствие передачи инвазии. (#зкнигиKnight and. Lok: Seasonal timing of heartworm chemoprophylaxis in US. In: Soil MD, Khight DH, eds: Proceedings of the Heartworm Symposium 1995. Batavia, IL: American Heartworm Society, 1995)

Эта схема основана на анализе температурных данных за 30 лет климатических наблюдений и дает крайние точки начала и конца сезона передачи (KnightandLok, 1995). Основанные на ограниченных полевых наблюдениях (KnightandLok, 1995; McTieretal., 1992), эти цифры могут давать ошибку в несколько недель. Карта на рис. 1 показывает месяцы, в первый день которых следует назначать профилактику макролидами, чтобы она приходилась на начало и конец сезона передачи.

Линия поведения с клиентами.
Ключом к осуществлению профилактического лечения против филярий является убеждение клиентов ежемесячно давать своим собакам филяриацидные препараты. Иногда люди отказываются от ежемесячного применения, но из этого вовсе не следует, что их животные обязательно заболеют. Другие же ветеринарные врачи, сильно обеспокоенные тем, что передача инфекции может произойти в любой момент, а также нерадивостью своих клиентов, которые не будут регулярно заниматься профилактическими лечебными мероприятиями, рекомендуют использовать препараты круглый год. Ни первый, ни второй подход не являются правильными. Наша задача — донести до клиентов в доступной форме необходимость медикаментозной защиты их животных. Нужно, чтобы они поняли, чем рискуют, отказываясь от профилактики, и в то же время правильно их проинформировать о действии препаратов. После того как клиент осознает всю важность профилактики, он будет со всей ответственностью выполнять установленную программу назначения препаратов. Пока филяриальная инвазия представляет реальную опасность в течение 9-10 месяцев в году, вся наша энергия должна быть сфокусирована на защите животных в этот опасный период.

Добавить комментарий

Ваш адрес email не будет опубликован. Обязательные поля помечены *